多年來(lái)，由于農(nóng)民的自繁自育自留種，使得馬鈴薯在生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)量逐年下降，品質(zhì)變劣，商品形狀變差等，經(jīng)科學(xué)家研究證明，病毒的侵染及其在薯塊內(nèi)積累是馬鈴薯“退化”的主要原因。為了解決我市馬鈴薯主栽品種嚴(yán)重退化，產(chǎn)量降低這一問(wèn)題，我所將馬鈴薯脫毒生產(chǎn)作為重點(diǎn)試驗(yàn)課題，針對(duì)脫毒生產(chǎn)中存在的問(wèn)題進(jìn)行了試驗(yàn)研究，從而利用了資源，降低了生產(chǎn)成本，為馬鈴薯的增產(chǎn)與增收提供了科學(xué)的理論依據(jù)，有力的加快了我市馬鈴薯脫毒薯生產(chǎn)的現(xiàn)代化進(jìn)程。
1 試驗(yàn)概況
1.1 試驗(yàn)材料 脫毒種苗由中國(guó)農(nóng)科院蔬菜花卉所提供。品種以我市主栽品種克新1號(hào)、克新3號(hào)為主，少量引進(jìn)克新13號(hào)、壩薯9號(hào)、壩薯10號(hào)，以及觀(guān)察試驗(yàn)品種費(fèi)烏瑞它、大西洋等。
1.2 試驗(yàn)地點(diǎn) 試驗(yàn)設(shè)在市農(nóng)科所植物組培與工廠(chǎng)化育苗車(chē)間，內(nèi)配備有空調(diào)，可調(diào)節(jié)溫度的變化。
1.3 試驗(yàn)日期 2004年3月購(gòu)進(jìn)脫毒苗，5月實(shí)驗(yàn)室儀器購(gòu)回后開(kāi)始少批量擴(kuò)轉(zhuǎn)，7月底進(jìn)行大批量生產(chǎn)。
2 試驗(yàn)方法
該試驗(yàn)生產(chǎn)的工藝流程是：培養(yǎng)基配置―裝瓶―滅菌―轉(zhuǎn)接―培養(yǎng)。
2.1 培養(yǎng)基的配置 馬鈴薯試管苗所需的培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽和離子的濃度高，是較穩(wěn)定的離子平衡溶液，其營(yíng)養(yǎng)的數(shù)量和比例能滿(mǎn)足植物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生理需要。（1）MS培養(yǎng)基配方：包括大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)物、其他（瓊脂、糖、滅菌水）；（2）母液配制：為使各種配料稱(chēng)取方便準(zhǔn)確，減少誤差及煩瑣，一般將各種試劑擴(kuò)大100倍，稱(chēng)取后配成母液，備用。每次配制培養(yǎng)基時(shí)，只需量取母液10ml/L制作培養(yǎng)基。（3）培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)：各種配料配好后，用pH試紙或pH儀測(cè)pH值，馬鈴薯試管苗所需的pH為5.8～6，再將瓊脂加熱至完全溶化即可。
2.2 裝瓶 將培養(yǎng)基裝入7×7×10cm的方體四旋口無(wú)色玻璃瓶，注意不要把培養(yǎng)基粘附到培養(yǎng)瓶口，一般裝培養(yǎng)基的量應(yīng)以能扶起每一莖段即可，裝好后用透氣的封口膜封口。
2.3 滅菌 滅菌采用高壓蒸汽滅菌鍋，溫度調(diào)控在121℃（正負(fù)誤差1℃），時(shí)間定為18～20分鐘。滅菌后緩慢放氣至常壓，或者自然冷卻，打開(kāi)鍋蓋將滅好菌的培養(yǎng)瓶放在工作臺(tái)上冷卻待用。
2.4 轉(zhuǎn)接 在接種室的超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，轉(zhuǎn)接材料為引進(jìn)的脫毒原原種，轉(zhuǎn)接工具有剪刀、鑷子、酒精燈、75%酒精等，完全按照無(wú)菌操作程序進(jìn)行。轉(zhuǎn)接時(shí)首先將種苗材料截成8～10mm長(zhǎng)，帶有1～2個(gè)腋芽的莖段，將莖段按植株原有的上下方向（一定要上下分清），垂直插于滅菌的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基面上，注意葉基的芽眼部位不能插入培養(yǎng)基內(nèi)。每瓶可均勻插入新莖段15～25個(gè)，以20株最好，有利于瓶的空間利用和種苗生長(zhǎng)，插好后用原封口膜封好，并標(biāo)明品種名稱(chēng)、轉(zhuǎn)接日期、轉(zhuǎn)接人等，在檔案記錄本上記載好原始檔案。
2.5 培養(yǎng) 培養(yǎng)所需的條件是：溫度一般為20～25℃，光照用日光燈做光源，每層培養(yǎng)架在距架面上30cm處安裝40w日光燈2個(gè)，達(dá)到2000lx的光照強(qiáng)度，基本滿(mǎn)足馬鈴薯脫毒苗的生長(zhǎng)需求。
3 試驗(yàn)結(jié)論與分析
3.1 生長(zhǎng)情況 試驗(yàn)材料在超凈工作臺(tái)轉(zhuǎn)接后，據(jù)觀(guān)察，在18～20℃、2000lx光照、密閉無(wú)菌條件時(shí)，頂芽2天后開(kāi)始生長(zhǎng)，3天開(kāi)始生根，22～25天可長(zhǎng)到5～6片葉、6～7cm高即可成株。用莖段轉(zhuǎn)接后，3天開(kāi)始生長(zhǎng)，5天開(kāi)始生根，25～30天即可成株。且在18～20℃時(shí)，苗壯葉大。在 25℃左右時(shí)，一般2天開(kāi)始發(fā)芽，3天開(kāi)始生根，20天即可成株，苗細(xì)弱，葉小。在28～30℃時(shí)，轉(zhuǎn)接后一天芽開(kāi)始生根，根少，且難成苗，多畸形。莖干變粗，頂芽壞死，無(wú)葉，生須根。觀(guān)察結(jié)論：試管苗在20℃左右培養(yǎng)時(shí)成苗率高。
3.2 污染情況 據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，試管苗生產(chǎn)中的前期擴(kuò)轉(zhuǎn)和冬季的生產(chǎn)，污染率為4.4%～5.7%左右，而中期8～9月高溫季節(jié)，污染率提高為15%左右，且多為細(xì)菌性污染。結(jié)論是；馬鈴薯試管苗的生產(chǎn)時(shí)期需避過(guò)高溫季節(jié)。
1 試驗(yàn)概況
1.1 試驗(yàn)材料 脫毒種苗由中國(guó)農(nóng)科院蔬菜花卉所提供。品種以我市主栽品種克新1號(hào)、克新3號(hào)為主，少量引進(jìn)克新13號(hào)、壩薯9號(hào)、壩薯10號(hào)，以及觀(guān)察試驗(yàn)品種費(fèi)烏瑞它、大西洋等。
1.2 試驗(yàn)地點(diǎn) 試驗(yàn)設(shè)在市農(nóng)科所植物組培與工廠(chǎng)化育苗車(chē)間，內(nèi)配備有空調(diào)，可調(diào)節(jié)溫度的變化。
1.3 試驗(yàn)日期 2004年3月購(gòu)進(jìn)脫毒苗，5月實(shí)驗(yàn)室儀器購(gòu)回后開(kāi)始少批量擴(kuò)轉(zhuǎn)，7月底進(jìn)行大批量生產(chǎn)。
2 試驗(yàn)方法
該試驗(yàn)生產(chǎn)的工藝流程是：培養(yǎng)基配置―裝瓶―滅菌―轉(zhuǎn)接―培養(yǎng)。
2.1 培養(yǎng)基的配置 馬鈴薯試管苗所需的培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽和離子的濃度高，是較穩(wěn)定的離子平衡溶液，其營(yíng)養(yǎng)的數(shù)量和比例能滿(mǎn)足植物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生理需要。（1）MS培養(yǎng)基配方：包括大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)物、其他（瓊脂、糖、滅菌水）；（2）母液配制：為使各種配料稱(chēng)取方便準(zhǔn)確，減少誤差及煩瑣，一般將各種試劑擴(kuò)大100倍，稱(chēng)取后配成母液，備用。每次配制培養(yǎng)基時(shí)，只需量取母液10ml/L制作培養(yǎng)基。（3）培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)：各種配料配好后，用pH試紙或pH儀測(cè)pH值，馬鈴薯試管苗所需的pH為5.8～6，再將瓊脂加熱至完全溶化即可。
2.2 裝瓶 將培養(yǎng)基裝入7×7×10cm的方體四旋口無(wú)色玻璃瓶，注意不要把培養(yǎng)基粘附到培養(yǎng)瓶口，一般裝培養(yǎng)基的量應(yīng)以能扶起每一莖段即可，裝好后用透氣的封口膜封口。
2.3 滅菌 滅菌采用高壓蒸汽滅菌鍋，溫度調(diào)控在121℃（正負(fù)誤差1℃），時(shí)間定為18～20分鐘。滅菌后緩慢放氣至常壓，或者自然冷卻，打開(kāi)鍋蓋將滅好菌的培養(yǎng)瓶放在工作臺(tái)上冷卻待用。
2.4 轉(zhuǎn)接 在接種室的超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，轉(zhuǎn)接材料為引進(jìn)的脫毒原原種，轉(zhuǎn)接工具有剪刀、鑷子、酒精燈、75%酒精等，完全按照無(wú)菌操作程序進(jìn)行。轉(zhuǎn)接時(shí)首先將種苗材料截成8～10mm長(zhǎng)，帶有1～2個(gè)腋芽的莖段，將莖段按植株原有的上下方向（一定要上下分清），垂直插于滅菌的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基面上，注意葉基的芽眼部位不能插入培養(yǎng)基內(nèi)。每瓶可均勻插入新莖段15～25個(gè)，以20株最好，有利于瓶的空間利用和種苗生長(zhǎng)，插好后用原封口膜封好，并標(biāo)明品種名稱(chēng)、轉(zhuǎn)接日期、轉(zhuǎn)接人等，在檔案記錄本上記載好原始檔案。
2.5 培養(yǎng) 培養(yǎng)所需的條件是：溫度一般為20～25℃，光照用日光燈做光源，每層培養(yǎng)架在距架面上30cm處安裝40w日光燈2個(gè)，達(dá)到2000lx的光照強(qiáng)度，基本滿(mǎn)足馬鈴薯脫毒苗的生長(zhǎng)需求。
3 試驗(yàn)結(jié)論與分析
3.1 生長(zhǎng)情況 試驗(yàn)材料在超凈工作臺(tái)轉(zhuǎn)接后，據(jù)觀(guān)察，在18～20℃、2000lx光照、密閉無(wú)菌條件時(shí)，頂芽2天后開(kāi)始生長(zhǎng)，3天開(kāi)始生根，22～25天可長(zhǎng)到5～6片葉、6～7cm高即可成株。用莖段轉(zhuǎn)接后，3天開(kāi)始生長(zhǎng)，5天開(kāi)始生根，25～30天即可成株。且在18～20℃時(shí)，苗壯葉大。在 25℃左右時(shí)，一般2天開(kāi)始發(fā)芽，3天開(kāi)始生根，20天即可成株，苗細(xì)弱，葉小。在28～30℃時(shí)，轉(zhuǎn)接后一天芽開(kāi)始生根，根少，且難成苗，多畸形。莖干變粗，頂芽壞死，無(wú)葉，生須根。觀(guān)察結(jié)論：試管苗在20℃左右培養(yǎng)時(shí)成苗率高。
3.2 污染情況 據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，試管苗生產(chǎn)中的前期擴(kuò)轉(zhuǎn)和冬季的生產(chǎn)，污染率為4.4%～5.7%左右，而中期8～9月高溫季節(jié)，污染率提高為15%左右，且多為細(xì)菌性污染。結(jié)論是；馬鈴薯試管苗的生產(chǎn)時(shí)期需避過(guò)高溫季節(jié)。
