表一、圖一、圖二和圖三為已報道的豬場臨床分離的致病大腸桿菌和鏈球菌的耐藥情況,均表現為嚴重的耐藥性和多重耐藥性,絕大多數菌株同時對十多種的抗生素具有耐藥性。即便就是從臨床健康豬也可以分離出鏈球菌,并且檢出率高,同時檢測株對臨床使用頻率較高的抗生素耐藥情況嚴重,主要有四環素、大環內酯類、頭孢菌素類、喹諾酮類以及磺胺類抗生素,并且出現了大量多重耐藥株。
在此背景下,我國從保護養殖業持續發展和人民健康安全的角度出發,啟動了動物源細菌耐藥性監測項目,對同一養殖場對不同飼養階段的動物定期分別采樣;主要采集泄殖腔拭子或動物組織,用以分離大腸桿菌、沙門氏菌、金葡菌、空腸彎曲菌等,測定這些菌株的MIC(最小抑菌濃度),來評價該養殖場的耐藥性流行情況,為合理用藥提供理論基礎,為全國性耐藥性的監測提供可靠數據和資料。
與耐藥菌抗爭必須掌握住關鍵性“武器”---藥敏實驗,因此豬病的診斷現在正在從臨床解剖走向實驗室檢測。監測臨床常見細菌的耐藥性現狀、預測細菌耐藥性變遷,以采取合理有效的措施,遏制細菌耐藥性的蔓延;根據細菌耐藥性監測數據,制定合理使用抗菌藥物的指導原則,規范臨床抗感染治療;這些已成為保護人畜健康的當務之急。細菌耐藥性監測的主要意義在于:(1)了解致病菌的耐藥機制以正確選用抗菌藥;(2)了解當地致病菌耐藥機制的發展趨勢,以制訂區域性的抗菌藥物使用指南;(3)了解細菌耐藥性的發生原因,以阻止耐藥性的發展。
目前最為普遍的藥敏實驗方法為紙片擴散法和MIC測定。其中紙片法擴散法是最適合常規實驗室使用。其特點是方便、易操作,測定的藥物隨意可變,靈活性強。重要的是紙片法藥敏試驗有一套完善的質量控制方法,結果相當可靠。紙片法唯一的不足是中度耐藥的菌株會出現問題。而MIC測定是把抗菌藥物倍比稀釋在肉湯或瓊脂中定量測定MIC的方法。稀釋法可以精確測定一些厭氧菌及苛養菌(對生長環境、營養要求較苛刻的細菌),而對這些菌,紙片擴散法是無能為力的。瓊脂稀釋法較肉湯稀釋法精確的原因在于細菌的生長情況可查,且一套平皿可測多株細菌,這兩種方法的缺點都耗時費力。對于藥敏實驗結果的判定分為以下三個標準:
敏感 (Susceptibillity, S):表明該菌株所致感染可以用推薦的抗菌藥物劑量進行治療,除非存在禁忌癥。
中等(Intermediate, I):用抗菌藥物MIC濃度治療菌株感染,可使血液和組織中藥物濃度接近通常可達到的水平,而抗生素治療的反應率可能低于敏感株。意味著藥物生理濃度部位具有臨床效力(如尿液中的喹諾酮類和β-內酰胺類)或可用高于正常劑量的藥物進行治療(β-內酰胺類)。該類還包括一個緩沖區,可防止微小的,未能控制的技術因素造成的結果解釋錯誤,特別是對那些安全范圍窄的藥物。
耐藥(Resistance, R):指按常規劑量使用,抗生素通常達到的全身濃度不能抑制其生長的菌株,和/或某些抗菌藥物的抑菌圈直徑在耐藥機制范圍,且臨床治療效果不可靠。
通過測定病原菌的敏感性,可以做到抗生素的合理使用,有效控制疫?。徊⑶冶苊饪顾幘甑某霈F,減少養殖成本;為耐藥性監測及流行病學調查提供臨床可靠的資料。因此如果不做病原分離和藥敏實驗,將會出現以下結果:1)治療過度,用藥不當,過度使用抗生素;2)治療錯誤----用藥錯誤,延誤治療效果;3)增加細菌的耐藥性的出現;4)增加生產成本和治療費用;5)影響食品安全,危及人類健康。
在獸醫臨床使用抗生素預防和治療疾病過程中,還要做的聯合使用、輪換使用和有計劃的階段性使用抗生素??股卣_和合理的使用將會提高治療和預防效果、減少細菌耐藥性產生、降低成本。如果不合理的使用將使菌群失調,二重感染、導致細菌發展多重耐藥、病情或疫情惡化、增加治療成本等等。
綜述可見,我們不僅要對病豬病料進行病原分離和藥敏實驗,還要定期對臨床健康豬群的致病菌攜帶情況進行調查和病原分離,掌握它們對各種抗生素的耐藥情況,為更好地監控病原菌耐藥性、防治細菌病以及有效防控細菌性傳染病的暴發具有重要價值。
目前,回盛生物科技有限公司擁有獸醫檢測實驗室,具備病原分離和耐藥性監測的儀器設備和人員,特面向廣大養殖戶提供豬源病原菌的分離以及耐藥性檢測服務,為廣大養殖戶養好豬保駕護航。
表1 來源于郭瀟木,中國畜牧獸醫, 2014, (01): 182-186
圖1來源于郭瀟木,中國畜牧獸醫, 2014,(01): 182-186
圖2 來源于黃文明,中國畜牧獸醫, 2013, (05): 54-58
圖3來源于黃文明,中國畜牧獸醫, 2013, (05): 54-58