2002年9月中旬,臨沂市蘭山區某養韶專業戶飼養的179只幼貂和58只成貂發生一種以發熱、嘔吐、呼吸困難、下痢、神經癥狀及最后衰竭死亡為主的傳染病,總發病率為67.9%,發病期間共死亡71只,死亡率占發病的44%,造成巨大的經濟損失。根據臨床癥狀、剖檢變化和實驗室診斷等手段,確診為水貂弓形蟲病與犬瘟熱病混合感染,并采取中西結合、綜合防治措施,使病情得到控制,現將診治情況報告如下。
1 臨床癥狀
發病水貂較多,癥狀各有不同,大體表現如下:病初,多數病貂體溫升高至40~42℃,精神沉郁,食欲減退;有的病貂呼吸困難,從鼻孔和眼內流出粘液;有的出現拒食、嘔吐,排水樣或血樣糞便;有的出現神經癥狀,表現為中樞神經功能紊亂,興奮性增高,不安或沉郁狀態,肌肉痙攣、昏迷、抽搐、轉圈、運動失調而呈醉酒樣等癥狀,最后衰竭死亡;幼貂出現突然視覺消逝,瞳孔高度散大,虹膜呈綠色變化;病程長短不一,1~10天不等。
2 剖檢變化
我們對死亡的7例進行了剖檢,其主要病理變化為:尸體消瘦,被毛常被糞便污染,皮膚無彈性;心肌遲緩,心內、外膜有出血斑點;肝臟腫大,充血、瘀血,有的表面布滿點狀壞死區;氣管粘膜有出血點;肺充血、水腫;腎臟腫大,被膜下有出血斑點;膀胱粘膜有點狀或條紋狀出血點;腦膜血管充血、水腫,有的腦實質水腫;全身淋巴結腫大,有的充血、水腫;胃、小腸粘膜充血、出血,胃底部發生潰瘍,腸腔內常有大量的血液和粘液等病變。
3 實驗室檢驗
3.1 細苗培養 無菌取新鮮病死水貂的肝臟、脾臟、心血、淋巴結等組織,分別接種于普通瓊脂培養基上,置37℃的恒溫箱中培養24小時,結果無細菌生長,說明本次疾病為非細菌性感染引起。
3.2 弓形蟲的實驗室檢驗
3.2.1 內臟組織涂片檢驗 取新鮮病死水貂的肝臟、肺臟、脾臟、淋巴結等病料分別涂片、自然干燥后,甲醇固定10分鐘,姬姆薩染色、干燥后鏡檢。發現有數量不等的一端稍尖,另一端鈍圓,呈香蕉形或弓形的滋養體,蟲體胞漿呈淡藍色,核呈紫紅色,位于蟲體中部偏向鈍圓的一端,每個視野中有單個、成雙或多個蟲體存在。
3.2.2 動物實驗 取新鮮病死水貂的肝臟、肺臟、淋巴結,研碎后加10倍生理鹽水,再加雙抗處理,然后室溫中放置1小時,用前振蕩,待重顆粒沉淀后,取上清液接種于小白鼠。選6只小白鼠,3只為1組,第1組每只腹腔接種1mL病料的上清液;第2組為對照組,腹腔注射1mL生理鹽水。接種后每天進行觀察,第3天第1組中有1只開始發病,1周后3只全部發病;對照組無異常變化。采發病小白鼠腹水1滴涂于載玻片上,加蓋玻片鏡檢,視野中發現有典型的弓形蟲。說明本場水貂已被弓形蟲感染。
3.3 病毒的實驗室檢驗
3.3.1 包涵體檢查 取新鮮病死水貂膀胱粘膜上皮少許,生理鹽水混勻涂片,自然干燥,立即進行美蘭、復紅染色,油鏡下觀察;結果發現膀胱上皮細胞胞漿中分布有大量紅色的犬瘟熱包涵體。
3.3.2 血清學試驗 采發病7天以上幼貂的血液適量,制備血清,經56℃30分鐘滅能,10倍系列稀釋,分別與恒定的不少于100個雞胚細胞的半數犬瘟熱病毒混合,放入4℃的冰箱中作用24小時,各取0.1mL接種于雞胚絨毛尿囊膜上,觀察6天,結果雞胚尿囊膜無變化,說明被檢血清中有犬瘟熱抗體。
3.3.3 動物實驗 取典型的剛死亡不久的幼貂的肝臟、脾臟、淋巴結等病料,制成乳劑,加入雙抗處理,離心20~30分鐘后,取上清液備用。選斷奶后15天的健康無病,沒有接種犬瘟熱疫苗的試驗幼犬4只,皮下注射其上清液5mL,結果4只幼犬4天后全部發病,呈典型的犬瘟熱癥狀。
通過以上檢驗,確認本病毒為犬瘟熱病毒。
根據本次水貂臨床表現、剖檢變化和實驗室檢驗,可確診為弓形蟲病和犬瘟熱的混合感染。
4 綜合防治措施
4.1 隔離與消毒 首先將發病水貂進行隔離,對籠舍、地面及糞便等用5%的熱氫氧化鈉溶液噴灑消毒,每天1次,連用2周;食槽及飲水槽,徹底清洗消毒,每天2次。對病死貂焚燒、深埋,堅決避免留做它用,加強飼養管理,所用飼料完全更換,供給新鮮、無污染、易消化的飼料,并給新鮮、清潔、無污染的飲水,避免本病的繼續傳播,加快本病的盡快恢復。
4.2 預防用藥 肌肉注射犬瘟熱抗血清1~2mL,每天1次,連用3天;同時用SMPZ治療,30mg/kg體重,首次量加1/3;同時使用磺胺增效劑TMP,10mg/kg體重;二者混合,每日1次內服,連用5天。用藥后,無新的病例出現。
4.3 治療
4.3.1 12%復方SMPZ注射液,按50mg/kg體重肌肉注射,每天2次,連用5天。同時配合復合VB、Vc注射液各1mL混合1次肌注。經觀察,癥狀較輕的用藥3天后明顯好轉,很快恢復正常,對較重,特別是明顯呼吸困難及神經癥狀的病貂,療效不佳,仍有部分病例死亡。
4.3.2 肌肉注射犬瘟熱抗血清3~5mL,每日1次,連用7~10天;同時肌肉注射病毒唑3~5mL、氟美松2~5mg,每日1次,連用7~10天。
4.3.3 加強對癥治療。發熱的病貂肌注安乃近注射液;脫水嚴重的用5%的糖鹽水、Vc等給以補液;便血者肌肉注射VK3;有神經癥狀的肌肉注射鹽酸氯丙嗪進行鎮靜。
4.3.4 配合中藥治療。以清熱解毒和殺蟲為主,佐以補氣補血,采用自組藥方:黃蒿20g、知母15g、生地10g、雙花15g、大青葉15g、柴胡10g、熟地10g、大棗15g、丹皮10g、炙黃芪10g、黨參10g、酒當歸10g、常山10g、炙甘草10g,混合水煎,供5~10只水貂內服,每天2次,連用5~7天。
經過以上綜合治療,3天開始有好轉,1周左右基本恢復正常,2周后回訪時除有2只幼貂出現后遺癥外,其他完全康復。神經癥狀嚴重病例因醫治無效而死亡。
5 小結
根據調查分析,本次疾病爆發的主要原因,作者認為,一是由于養殖戶懷有僥幸心理,沒有進行犬瘟熱免疫預防;二是對飼料管理不善,老鼠較多,引來貓的光顧,有弓形蟲卵囊的糞尿污染了飼料,從而造成感染;三是由于犬瘟熱病毒的免疫抑制特點,導致一些不表現臨床癥狀的弓形蟲攜帶者繼發感染而發病;四是由于犬瘟熱病毒和弓形蟲的混合感染,加重了病情,造成本病爆發流行。因此,建議養貂戶,除注意平時的飼養管理外,還應加強各種疫病的預防工作,這是防止發病的主要措施。
1 臨床癥狀
發病水貂較多,癥狀各有不同,大體表現如下:病初,多數病貂體溫升高至40~42℃,精神沉郁,食欲減退;有的病貂呼吸困難,從鼻孔和眼內流出粘液;有的出現拒食、嘔吐,排水樣或血樣糞便;有的出現神經癥狀,表現為中樞神經功能紊亂,興奮性增高,不安或沉郁狀態,肌肉痙攣、昏迷、抽搐、轉圈、運動失調而呈醉酒樣等癥狀,最后衰竭死亡;幼貂出現突然視覺消逝,瞳孔高度散大,虹膜呈綠色變化;病程長短不一,1~10天不等。
2 剖檢變化
我們對死亡的7例進行了剖檢,其主要病理變化為:尸體消瘦,被毛常被糞便污染,皮膚無彈性;心肌遲緩,心內、外膜有出血斑點;肝臟腫大,充血、瘀血,有的表面布滿點狀壞死區;氣管粘膜有出血點;肺充血、水腫;腎臟腫大,被膜下有出血斑點;膀胱粘膜有點狀或條紋狀出血點;腦膜血管充血、水腫,有的腦實質水腫;全身淋巴結腫大,有的充血、水腫;胃、小腸粘膜充血、出血,胃底部發生潰瘍,腸腔內常有大量的血液和粘液等病變。
3 實驗室檢驗
3.1 細苗培養 無菌取新鮮病死水貂的肝臟、脾臟、心血、淋巴結等組織,分別接種于普通瓊脂培養基上,置37℃的恒溫箱中培養24小時,結果無細菌生長,說明本次疾病為非細菌性感染引起。
3.2 弓形蟲的實驗室檢驗
3.2.1 內臟組織涂片檢驗 取新鮮病死水貂的肝臟、肺臟、脾臟、淋巴結等病料分別涂片、自然干燥后,甲醇固定10分鐘,姬姆薩染色、干燥后鏡檢。發現有數量不等的一端稍尖,另一端鈍圓,呈香蕉形或弓形的滋養體,蟲體胞漿呈淡藍色,核呈紫紅色,位于蟲體中部偏向鈍圓的一端,每個視野中有單個、成雙或多個蟲體存在。
3.2.2 動物實驗 取新鮮病死水貂的肝臟、肺臟、淋巴結,研碎后加10倍生理鹽水,再加雙抗處理,然后室溫中放置1小時,用前振蕩,待重顆粒沉淀后,取上清液接種于小白鼠。選6只小白鼠,3只為1組,第1組每只腹腔接種1mL病料的上清液;第2組為對照組,腹腔注射1mL生理鹽水。接種后每天進行觀察,第3天第1組中有1只開始發病,1周后3只全部發病;對照組無異常變化。采發病小白鼠腹水1滴涂于載玻片上,加蓋玻片鏡檢,視野中發現有典型的弓形蟲。說明本場水貂已被弓形蟲感染。
3.3 病毒的實驗室檢驗
3.3.1 包涵體檢查 取新鮮病死水貂膀胱粘膜上皮少許,生理鹽水混勻涂片,自然干燥,立即進行美蘭、復紅染色,油鏡下觀察;結果發現膀胱上皮細胞胞漿中分布有大量紅色的犬瘟熱包涵體。
3.3.2 血清學試驗 采發病7天以上幼貂的血液適量,制備血清,經56℃30分鐘滅能,10倍系列稀釋,分別與恒定的不少于100個雞胚細胞的半數犬瘟熱病毒混合,放入4℃的冰箱中作用24小時,各取0.1mL接種于雞胚絨毛尿囊膜上,觀察6天,結果雞胚尿囊膜無變化,說明被檢血清中有犬瘟熱抗體。
3.3.3 動物實驗 取典型的剛死亡不久的幼貂的肝臟、脾臟、淋巴結等病料,制成乳劑,加入雙抗處理,離心20~30分鐘后,取上清液備用。選斷奶后15天的健康無病,沒有接種犬瘟熱疫苗的試驗幼犬4只,皮下注射其上清液5mL,結果4只幼犬4天后全部發病,呈典型的犬瘟熱癥狀。
通過以上檢驗,確認本病毒為犬瘟熱病毒。
根據本次水貂臨床表現、剖檢變化和實驗室檢驗,可確診為弓形蟲病和犬瘟熱的混合感染。
4 綜合防治措施
4.1 隔離與消毒 首先將發病水貂進行隔離,對籠舍、地面及糞便等用5%的熱氫氧化鈉溶液噴灑消毒,每天1次,連用2周;食槽及飲水槽,徹底清洗消毒,每天2次。對病死貂焚燒、深埋,堅決避免留做它用,加強飼養管理,所用飼料完全更換,供給新鮮、無污染、易消化的飼料,并給新鮮、清潔、無污染的飲水,避免本病的繼續傳播,加快本病的盡快恢復。
4.2 預防用藥 肌肉注射犬瘟熱抗血清1~2mL,每天1次,連用3天;同時用SMPZ治療,30mg/kg體重,首次量加1/3;同時使用磺胺增效劑TMP,10mg/kg體重;二者混合,每日1次內服,連用5天。用藥后,無新的病例出現。
4.3 治療
4.3.1 12%復方SMPZ注射液,按50mg/kg體重肌肉注射,每天2次,連用5天。同時配合復合VB、Vc注射液各1mL混合1次肌注。經觀察,癥狀較輕的用藥3天后明顯好轉,很快恢復正常,對較重,特別是明顯呼吸困難及神經癥狀的病貂,療效不佳,仍有部分病例死亡。
4.3.2 肌肉注射犬瘟熱抗血清3~5mL,每日1次,連用7~10天;同時肌肉注射病毒唑3~5mL、氟美松2~5mg,每日1次,連用7~10天。
4.3.3 加強對癥治療。發熱的病貂肌注安乃近注射液;脫水嚴重的用5%的糖鹽水、Vc等給以補液;便血者肌肉注射VK3;有神經癥狀的肌肉注射鹽酸氯丙嗪進行鎮靜。
4.3.4 配合中藥治療。以清熱解毒和殺蟲為主,佐以補氣補血,采用自組藥方:黃蒿20g、知母15g、生地10g、雙花15g、大青葉15g、柴胡10g、熟地10g、大棗15g、丹皮10g、炙黃芪10g、黨參10g、酒當歸10g、常山10g、炙甘草10g,混合水煎,供5~10只水貂內服,每天2次,連用5~7天。
經過以上綜合治療,3天開始有好轉,1周左右基本恢復正常,2周后回訪時除有2只幼貂出現后遺癥外,其他完全康復。神經癥狀嚴重病例因醫治無效而死亡。
5 小結
根據調查分析,本次疾病爆發的主要原因,作者認為,一是由于養殖戶懷有僥幸心理,沒有進行犬瘟熱免疫預防;二是對飼料管理不善,老鼠較多,引來貓的光顧,有弓形蟲卵囊的糞尿污染了飼料,從而造成感染;三是由于犬瘟熱病毒的免疫抑制特點,導致一些不表現臨床癥狀的弓形蟲攜帶者繼發感染而發病;四是由于犬瘟熱病毒和弓形蟲的混合感染,加重了病情,造成本病爆發流行。因此,建議養貂戶,除注意平時的飼養管理外,還應加強各種疫病的預防工作,這是防止發病的主要措施。