由臨床癥狀、病理變化和微生物檢查,可作出正確判斷。可用X射線做早期診斷,也可用鼻腔鏡作輔助性診斷。
(一)細菌學檢查
鼻外部消毒后,用無菌棉拭子插出鼻腔中較深的部位,輕輕轉動幾次,使其沾上黏液或分泌物,立即放人裝有肉湯的小試管中,塞緊管塞,送檢。也可直接無菌采取鼻腔后部、支氣管的分泌物及肺組織等。
4h內進行細菌分離培養,可應用改良馬丁瓊脂(含牛裂解血球液0.1%、牛血清2%、鹽酸潔霉素1μg/mL,硫酸新霉素1.9μg/m L)平板和血紅素痢特靈改良麥康凱瓊脂(彭發泉等1986)平板,37℃培養18h分離Pm,培養44h分離Bb 。 Bb分離株依據菌落特征和平板凝集反應加以鑒定,Bb37℃培養24h,菌落呈針尖大小;48h菌落為2mm大,呈灰褐色,半透明狀、隆起、光滑,有特殊霉臭味。涂片、染色、鏡檢。革蘭染色,可見到革蘭陰性小桿菌,有兩極著色的趨勢。
生化鑒定,支氣管敗血波氏桿菌主要的生化特點是:有運動性,甲基紅試驗、VP試驗均為陰性,不分解葡萄糖二分解尿素,能利用枸櫞酸鹽,過氧化氫酶和氧化酶試驗均為陽性。
(二)Pm分離株的產毒素能力檢查
采用豚鼠皮膚壞死試驗( DeJong,M.F.1980)進行。用馬丁肉湯37℃培養36h的菌液O.lmL注射于體重350g的健康豚鼠背部皮內,觀察72h。皮膚出現直徑大于0.5cm以上的壞死區為陽性反應(DNT+),無反應或僅一過性紅腫為陰性(DNT-)。
(三)X射線攝片檢查