豬玉米赤霉烯酮中毒確診方法

將購買的玉米直接堆放在新蓋平房的水泥地面上，開包檢查，聞有霉味，發現有的玉米粒表面長有白色綿絲狀物；粉碎的剩余玉米也有霉味。

原分離培養

取玉米粒和混合飼料樣，0.1%升汞消毒1min，無菌蒸餾水沖洗，然后將樣品分別無菌接種于加有抗菌素的卡貝克(czapek)瓊脂培養基平皿各5個，另設3個無菌蒸餾水對照培養基平皿，25～28℃培養72h。接樣培養基都長有白色絨絲狀物，取培養物涂片，乳酸酚棉藍染色鏡檢，見有分隔菌絲和孢子，大分生孢子呈鐮刀狀、中間有2～5個隔，小分生孢子多為卵圓形細胞;而對照培養基平皿均未見類似菌落。

毒素檢測

隨機抽取玉米樣和混合飼料樣，玉米赤霉烯酮毒素提取和氣相色譜測定參考文獻的方法進行。測得玉米樣和混合飼料樣中玉米赤霉烯酮的含量分別為2.51mg/kg和1.85mg/kg。挑取上述病原分離培養物，以pH8.0的PBS液稀釋，用0.3μm濾膜過濾除菌，將少量過濾液接種到長成單層的PK15細胞上，36h后，細胞質濃縮、顆粒化，核濃縮、碎裂、液化，細胞呈中毒樣病變;而未接種過濾液的細胞生長正常。根據發病情況、臨床癥狀、實驗室檢查，初步診斷為鐮刀菌引起的豬玉米赤霉烯酮中毒。