針對目前國內紅掌和鳳梨種苗主要依賴進口的現實問題,本文就引進市場上熱銷的頗有潛力的紅掌和觀賞鳳梨品種,采用現代植物組織培養技術和溫室大棚栽培技術,研究開發和推廣質優價廉的組培苗,希望對國內同行有一定的參考價值。
一、引進名優品種
在國內外市場上暢銷的名優品種,如亞利桑娜、熱情、情人紅、粉冠軍等紅掌,以及吉利紅星、丹尼斯等鳳梨。引進的主要形式是母株外殖體。
二、無菌系建立和維持
根據課題設計的技術路線,一方面從植株采取幼嫩莖段或芽段,進行常規消毒后,接種到培養基上;另一方面,采取幼嫩葉片,進行常規消毒后,接種到誘導培養基上。
莖段或芽段的消毒方法:取嫩的莖段或芽段在自來水中沖洗10分鐘,放進無菌水中浸泡30秒鐘,用0.1%滅菌消毒15秒鐘,用無菌水沖洗2次后放進70%酒精泡30秒鐘,再用0.1%的升汞浸泡20分鐘,最后用無菌水沖洗3次,可以在超凈臺上進行接種。
葉片消毒方法:取嫩葉用70%的酒精擦拭表面,接著在無菌水中洗2分鐘,把葉片切成1平方厘米,放進加有1~2滴吐溫80的1%NaOCI溶液浸泡30秒,放在超凈臺上用無菌水;中洗3~4次,就可以接種。
結果表明,在莖段培養方面沒有取得突破性進展,主要問題在于不能徹底消毒。若消毒時間不夠,接種材料很快污染;消毒時間過長,則往往會將材料殺死;有時候,一些材料在初代接種時既沒有污染,也沒有死亡,但往往在轉瓶繼代培養時又出現污染。這種污染往往是由內生細菌污染引起。
葉片培養途徑的成功率高,可達80~90%以上。但是,這種方法所需要的時間也較長,葉片培養完成脫分化和再分化的時間少則半年,多則一年以上;而且,葉片培養對培養基的要求也較為苛刻,期間需要不斷調整培養基。篩選出一些主要品種葉片培養途徑所需的培養基配方,成功地獲得了無菌種芽。
三、工廠化生產紅掌和鳳梨組培苗
經過多次試驗,最終篩選出適合的增殖和生根培養基(表2),紅掌繼代培養的時間為40~45天,鳳梨繼代培養的時間為50~60天,具體還需要觀察增殖芽的長勢情況;培養的條件為溫度為25~30℃,光照強度為1500~2500LUX,每天人工光照14~16小時;接種時除了控制降低污染率外,還要注意到在切割時鳳梨的生長點較低,不要切掉生長點,同時要去掉老的愈傷組織。
從培養基的篩選、培養條件的控制、切割方法的試驗,使增殖率MR值為2.5(紅掌)和3.0(丹尼斯鳳梨),生根率達到98%以上。實現了工廠化生產,建立起工廠化快繁體系。依托該體系,可以使1瓶無菌種芽在10個月時間內擴增到1000瓶以上。
在組培過程中,必須注意控制種芽的增殖代數,通常在18代以下,這樣既可以保證質量和數量要求,也為后續種芽的開發提供了充裕的時間。同時,為保證種芽質量,降低污染率項目組還配備有專門的質檢人員加強管理,從水質的檢測、培養基配制、人工切割、環境條件的控制一直到培養空間的消毒均采取一系列有效的措施,及時發現和處理不正常的種芽,如玻璃苗、花葉、皺葉等。
四、組培苗的培育和馴化
當組培苗在培養瓶中生長成為完整的植株后,經過一段時期的煉苗,則需要將瓶苗取出來,清洗干凈,消毒,移栽到栽培基質中,再經過一段時期的培育,達到一定的規格以后,方可作為成品種苗銷售。
在組培苗的培育和馴化的各個階段,應制訂嚴格的操作規程,由花棚專門的栽培技術人員執行。首先組培苗出瓶時要嚴格地消毒,方法是將健壯無污染的組培苗小心取出用清水洗)爭殘余的培養基,放入1000倍50%的多菌靈溶液中浸30秒后即可;栽培用的基質是由泥炭、珍珠巖和椰糠等按照一定的比例調配而成,經過消毒處理后備用;紅掌組培苗的移基質為泥炭土∶珍珠巖=6∶1,鳳梨組培苗移栽基質為泥炭:珍珠巖∶椰糠=4∶1∶3;培養的條件是溫度控制在自天25~30℃,夜晚20~25℃,濕度60~80%,光線強度在8000~15000LUX為佳,溫度低于。15℃或高于33℃時容易受到傷害(紅掌組培苗比鳳梨組培苗更容易受到傷害);因組培苗比較嬌嫩易受病菌的感染,移栽的環境和所用的工具、用具都必須清洗干凈,經過高錳酸鉀溶液漂洗消毒以后方可使用。結果表明,紅掌和鳳梨組培苗的移栽成活率達到98%以上,組培苗3~4厘米經過50~60天的培養即可以達到出貨的標準。
一、引進名優品種
在國內外市場上暢銷的名優品種,如亞利桑娜、熱情、情人紅、粉冠軍等紅掌,以及吉利紅星、丹尼斯等鳳梨。引進的主要形式是母株外殖體。
二、無菌系建立和維持
根據課題設計的技術路線,一方面從植株采取幼嫩莖段或芽段,進行常規消毒后,接種到培養基上;另一方面,采取幼嫩葉片,進行常規消毒后,接種到誘導培養基上。
莖段或芽段的消毒方法:取嫩的莖段或芽段在自來水中沖洗10分鐘,放進無菌水中浸泡30秒鐘,用0.1%滅菌消毒15秒鐘,用無菌水沖洗2次后放進70%酒精泡30秒鐘,再用0.1%的升汞浸泡20分鐘,最后用無菌水沖洗3次,可以在超凈臺上進行接種。
葉片消毒方法:取嫩葉用70%的酒精擦拭表面,接著在無菌水中洗2分鐘,把葉片切成1平方厘米,放進加有1~2滴吐溫80的1%NaOCI溶液浸泡30秒,放在超凈臺上用無菌水;中洗3~4次,就可以接種。
結果表明,在莖段培養方面沒有取得突破性進展,主要問題在于不能徹底消毒。若消毒時間不夠,接種材料很快污染;消毒時間過長,則往往會將材料殺死;有時候,一些材料在初代接種時既沒有污染,也沒有死亡,但往往在轉瓶繼代培養時又出現污染。這種污染往往是由內生細菌污染引起。
葉片培養途徑的成功率高,可達80~90%以上。但是,這種方法所需要的時間也較長,葉片培養完成脫分化和再分化的時間少則半年,多則一年以上;而且,葉片培養對培養基的要求也較為苛刻,期間需要不斷調整培養基。篩選出一些主要品種葉片培養途徑所需的培養基配方,成功地獲得了無菌種芽。
三、工廠化生產紅掌和鳳梨組培苗
經過多次試驗,最終篩選出適合的增殖和生根培養基(表2),紅掌繼代培養的時間為40~45天,鳳梨繼代培養的時間為50~60天,具體還需要觀察增殖芽的長勢情況;培養的條件為溫度為25~30℃,光照強度為1500~2500LUX,每天人工光照14~16小時;接種時除了控制降低污染率外,還要注意到在切割時鳳梨的生長點較低,不要切掉生長點,同時要去掉老的愈傷組織。
從培養基的篩選、培養條件的控制、切割方法的試驗,使增殖率MR值為2.5(紅掌)和3.0(丹尼斯鳳梨),生根率達到98%以上。實現了工廠化生產,建立起工廠化快繁體系。依托該體系,可以使1瓶無菌種芽在10個月時間內擴增到1000瓶以上。
在組培過程中,必須注意控制種芽的增殖代數,通常在18代以下,這樣既可以保證質量和數量要求,也為后續種芽的開發提供了充裕的時間。同時,為保證種芽質量,降低污染率項目組還配備有專門的質檢人員加強管理,從水質的檢測、培養基配制、人工切割、環境條件的控制一直到培養空間的消毒均采取一系列有效的措施,及時發現和處理不正常的種芽,如玻璃苗、花葉、皺葉等。
四、組培苗的培育和馴化
當組培苗在培養瓶中生長成為完整的植株后,經過一段時期的煉苗,則需要將瓶苗取出來,清洗干凈,消毒,移栽到栽培基質中,再經過一段時期的培育,達到一定的規格以后,方可作為成品種苗銷售。
在組培苗的培育和馴化的各個階段,應制訂嚴格的操作規程,由花棚專門的栽培技術人員執行。首先組培苗出瓶時要嚴格地消毒,方法是將健壯無污染的組培苗小心取出用清水洗)爭殘余的培養基,放入1000倍50%的多菌靈溶液中浸30秒后即可;栽培用的基質是由泥炭、珍珠巖和椰糠等按照一定的比例調配而成,經過消毒處理后備用;紅掌組培苗的移基質為泥炭土∶珍珠巖=6∶1,鳳梨組培苗移栽基質為泥炭:珍珠巖∶椰糠=4∶1∶3;培養的條件是溫度控制在自天25~30℃,夜晚20~25℃,濕度60~80%,光線強度在8000~15000LUX為佳,溫度低于。15℃或高于33℃時容易受到傷害(紅掌組培苗比鳳梨組培苗更容易受到傷害);因組培苗比較嬌嫩易受病菌的感染,移栽的環境和所用的工具、用具都必須清洗干凈,經過高錳酸鉀溶液漂洗消毒以后方可使用。結果表明,紅掌和鳳梨組培苗的移栽成活率達到98%以上,組培苗3~4厘米經過50~60天的培養即可以達到出貨的標準。