近幾年來，食用菌行業逐漸進入專業戶規模化、合作社規模化，尤其是工廠化生產模式，開放式接種形式被盲目效仿應用。近日，我們從西峽縣食用菌科研中心閆新發老師那里獲悉，經過西峽縣及周邊地區部分菇農近20年的規模產業的調查驗證，由于接種季節的溫度和濕度，對自然空氣中飄附塵埃中的雜菌孢子和致病菌類細菌等有害病菌，在自然溫濕度條件下的繁殖密度、傳播、漂浮、生命力延續，以及存活的活性影響效果，造成食用菌不同接種條件下，接種后的雜菌污染率呈現不穩定狀態，偶爾出現的小環境范圍的接種成品率接近箱式接種效果，而大部分菇農接種的染雜率在30%～80%左右，總平均成品率60%左右，嚴重影響規模產業投資效益，因此影響食用菌產業的發展速度和社會效益。現將他們用于規模生產的推廣經驗進行簡介，供參考。
1、染雜隱患類型分析
1.1 自然空氣含帶雜菌的染雜途徑及措施：常見食用菌的雜菌污染率比較高的季節溫度在18℃以上，以25℃以上氣溫條件下的污染率比較嚴重。根據觀察和大量栽培經驗驗證，中原地區從“清明”節令開始，隨著自然界中綠色植被發芽后的地面綠化，自然空氣濕度逐漸增加，空氣中的雜菌含量隨之增多。如果選用徹底滅菌后的袋料進行試驗，在30℃左右自然環境溫度條件下，不進行任何消毒和防護措施，實驗性打孔接入固體菌種，可以看到“全菌覆沒”，全部污染雜菌的現象，簡單的試驗就可以說明自然空氣中含有多種雜菌和致病菌的自然現象。因此，規模化生產反復驗證，采用開放式接種的菌棒不污染雜菌的安全系數，經常在30%～85%左右徘徊。有實踐經驗的栽培者，選擇偏低溫度時段的夜間、早上、下雨后、嚴格消毒的房間內接種，也有偶爾出現95以上成菌率的，而偶遇的經濟代價實在太大了。
解決方法：進行嚴格的接種環境封閉性嚴密消毒，不允許自然空氣自由流通。
1.2 袋料表面攜帶雜菌的染雜途因素及措施：經過消毒處理后的塑料栽培袋表面，仍然保留著表面原來粘附的微粒狀原料和塵埃，如果在自然環境中降溫和存放，就給空氣中漂浮的雜菌和病菌提供了溫度、濕度、營養兼備的寄生環境，而使袋料表面沉積相當數量的雜菌孢子和致病菌，如果是在封閉的房間內，進行開放式接種，產生的現象是：隨著接種后的袋料數量的增加，染雜菌袋料比率也在增多。這種現象的主要原因是袋料表面被壓在代了堆垛之間的含雜菌灰塵，經過接種過程，逐漸散發和釋放到接種場合，而被接入到接種的空穴里了。
解決方法：對滅菌后的袋料進行氣霧消毒狀態下的封閉降溫。
1.3 菌種攜帶雜菌的染雜因素及措施：菌種攜帶雜菌的因素，除了具有與袋料表面攜帶雜菌相同的現象外，還有封口棉塞外壁和其中呼吸的空氣、瓶蓋絲扣或扎口繩之間、以及菌種培養過程中選雜菌看不到的潛伏雜菌和病菌。例如中心打孔接種的菌種，或者使用低于22℃溫度培養的菌種中潛伏的中高溫類雜菌和致病菌。
解決方法有以下幾種：（1）用24℃～26℃恒溫培養菌種。（2）接種之前，把菌種袋（瓶）放到殺菌溶液中浸透表面和棉塞，封閉表面和面塞內的含雜空氣。（3）是仔細挑選優質純菌種，使用時仔細觀察，防止把含雜菌的菌種接入菌種穴。（4）嚴禁采用開放式接種方法制作菌種。（5）不用老化菌種和含水率偏高的菌種。（6）選用表面接種的菌種，接種時去除2cm表面老化菌種不用。
1.4 人體活動攜帶雜菌的染雜因素及措施：接種人員攜帶雜菌的因素包括：頭發和衣服中的自然空氣、呼出氣體和鞋襪攜帶的含雜菌病菌塵埃、進入接種環境時隨身流入的自然空氣、人體皮膚表面攜帶的病菌等。
解決方法有這樣幾種：（1）接種人員選用具有過濾雜菌效果的頭罩、口罩、塑料腳褲套、松緊口式工作服并經過消毒，限制體內和衣服中的自然空氣自由流通。（2）設置緩沖間，進行衣物消毒和自然空氣流通的隔離。（3）在接種人員進入接種環境時，用消毒藥霧封閉進口。
1.5 接種環節常見染雜隱患及措施：接種過程常見染雜隱患（1）接種環境消毒不嚴格。（2）人員隨便出進引入大量自然空氣。（3）接種操作程序不經消毒。（4）菌種、打孔錐隨便放置。（5）接種的手不經任何消毒措施，或經過消毒后隨處觸摸（如接種的消毒后之手移動袋料之后不經消毒而直接拿菌種接種等）。（6）采用“一抹凈”誤導消毒理念，乎略環境空氣含帶大量未經消毒的自然空氣，在拔出打孔錐的瞬間已經進入菌種穴內的污染雜菌隱患 危害性。（7）消毒的藥品或器械的實際消毒效果不確切，并無法驗證。
解決方法：設計“無菌化”接種操作程序：封閉接種環境；——采用95%酒精用于袋料接種穴表面消毒；——菌種和打孔錐固定放置到酒精消毒小毛巾的容器中；——接種的手每次拿菌種之前進行一次酒精消毒，消過毒的手指不允許觸及菌種以外的任何部位；——接種場地配用臭氧發生器，對工作人員活動和呼出的空氣進行現場消毒（需要注意的是：設計專家提示，臭氧消毒方法產生實際效果的時間是60min左右之后）。
1.6 發菌管理環節染雜因素分析：開放式接種的發菌管理環境溫度，以22～25℃為適宜，濕度保持55%～75%為適宜。培養濕度和溫度過高條件下，容易在環境中產生濃厚的雜菌滋生條件，有經驗的管理員，進入管理環境聞一下氣味就知道養菌環境是否有雜菌滋生。尤其是菌種穴直徑大于10cm以后，培養環境溫度高于25℃，用以造積溫成燒菌現象。輕度燒菌的菌絲由濃白色變成米黃色。燒菌后的菌穴中的菌絲抗病能力急劇下降，極易污染雜菌。特別是栽培菌棒采用套袋封口，配用75%酒精及其他消毒藥品含水量大于30%進行消毒的，脫袋后容易產生菌種穴黑窩、流黃水、生蛆等現象。其中原因是，菌種表面吸收了消毒后的生于水分和接種環境中的致病菌，脫袋后又吸附大量自然環境溫度和濕度條件下的雜菌和病菌而導致。
解決方法:脫去外套袋時，需要快速通風，讓菌種穴表面呈現偏干燥狀態，不給后期污染雜菌和病菌提供滋生條件。
2、 綜合防止染雜措施及程序設計要點
以上分析表明，雜菌污染率升高的主要因素：（1）是菌種攜帶。（2）是袋料生產過程形成（如微孔和表面攜帶）。（3）接種人員攜帶和釋放。（4）是操作過程粗糙。（5）是選用消毒藥品不當。（6）是管理方法和措施失控。（7）是接種和養菌環境中的空氣中存在較多雜菌和病菌等等各種緣故。（8）是缺乏食用菌應用技術與“無菌化”概念的經驗。所有防止染雜因素和技術措施的配合，既需要對選用品種基本理論基礎的學習和了解，更需要較長時間的反復實踐的經驗積累。
所有染雜因素，都是栽培者既無法觀察，又無法檢測的模糊概念。實際生產應用程序的設計，是根據現實條件和選用措施的可操作性及可靠性的掌握為基礎。根據上述分析情況，設計的“開放式”接種的“無菌化”應用生產管理程序如下：
（1）提前半天或一天“控濕”拌料——解決培養料中雜菌孢子不容易滅菌徹底問題。
（2）裝好的袋料浮水檢孔——解決原料粗糙，栽培袋微孔容易染雜問題。
（3）滅菌后趁熱封閉降溫——解決袋料表面攜帶含雜菌問題。
（4）塑料吊棚全封閉接種——解決大環境“無菌化”控制困難問題。
（5）吊棚（房間）進口增加“緩沖間”——解決工作衣物消毒和人體帶入自然空氣消毒問題。
（6）藥霧降塵和封閉接種入口——解決人體攜帶自然空氣含帶雜菌問題。
（7）著裝頭帽、口罩（用開水津后擰干）、松緊口細布衣服、塑料袋套扎腳和褲口——解決人體攜帶和釋放雜菌問題。
（8）接種工作臺加放臭氧消毒機——解決接種環境中的剩余雜菌和病菌（30min以后的）積累問題。
（9）采用95%酒精消毒——解決接種穴消毒藥劑套袋后的剩余水分為雜菌提供菌種穴表面滋生問題。
（10）養菌環境用臭氧定時消毒——解決養菌環境滋生雜菌和病菌問題。
（11）注意事項：① 一個房間的空間容量的塑料吊棚，一次放入接種袋料數量參考6～7個人一次進入接種時間不超過3h為準，因為封閉的接種環境中的氧氣供應限制，最長不宜超過3.5h。② 在房里開放接種，門口及其門邊縫隙需要用膠帶封閉。③ 接種人員應具有健康身體，如果接種過程產生頭暈、氣短等不良反應的人，護送出接種環境，即可恢復正常狀態。
3、“開放式”接種的“無菌化”效果分析
上述“無菌化”開放接種程序，是為浙江省機械化實驗場——臨安科技開發有限公司的工廠化生產秀珍菇、姬菇、白玉菇、杏鮑菇、茶樹菇、金針菇而設計的，接種袋料的染雜比例小于2%，首批接種安全系數核定為99.67%。經過2006年以來，該公司一直沿用這一程序進行生產。2007～2011年期間，選用程序中的（1）、（2）、（3）和（9），配合箱式接種的“無菌化”程序，穩定解決了遼寧省盤錦市鼎泰農業開發有限公司、河南省三門峽市和靈寶市區的合作社等大型食用菌生產菇場，接種袋料染雜率高而不穩定問題，受過培訓的菇場接種安全系數穩定在95﹪以上。并且配合西峽縣的農業廣播電視分校對規模化產業進行技術輔導，相繼解決了規模生產中出現的各種疑難問題，所到之處，深深受到西峽菇農的歡迎。
