[摘要](1)培養(yǎng)基配方: 用500ml罐頭瓶作為培養(yǎng)容器,在每個(gè)瓶中放入混合培養(yǎng)基,其體積約為容器容積的1 5~1 4,即大米35g、蠶蛹粉1g、營養(yǎng)液55ml(蛋白胨、維生素、硫酸鎂等),pH值調(diào)到5~7,然后用聚丙烯膜封口。
(1)培養(yǎng)基配方: 用500ml罐頭瓶作為培養(yǎng)容器,在每個(gè)瓶中放入混合培養(yǎng)基,其體積約為容器容積的1/5~1/4,即大米35g、蠶蛹粉1g、營養(yǎng)液55ml(蛋白胨、維生素、硫酸鎂等),pH值調(diào)到5~7,然后用聚丙烯膜封口。
(2)高壓滅菌: 裝瓶后立即置滅菌灶進(jìn)行滅菌,常壓滅菌應(yīng)在 100℃保持10~12小時(shí),或高壓滅菌在1.47×105Pa下保持1.5小時(shí)以上。滅菌后瓶內(nèi)米飯應(yīng)上下干濕一致,趁熱將瓶立即運(yùn)入接種室自然降溫至30℃以下備用。
(3)接種及發(fā)菌: 接種室要求干燥、清潔。接種時(shí)將裝有培養(yǎng)基的罐頭瓶放入接種箱或超凈工作臺(tái)中嚴(yán)格消毒、規(guī)范操作,以降低污染率。 將接種好的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)室的層狀培轤養(yǎng)架上,在清潔黑暗條件下發(fā)菌培養(yǎng)。培養(yǎng)室的空氣濕度保持在60~65%,室溫為18℃左右,不須通風(fēng)。接種之后的前3天要求每天搖瓶一次,以使培養(yǎng)料表面盡快布滿菌絲,一般經(jīng)過15~20天的培養(yǎng),菌絲可吃透培養(yǎng)料,進(jìn)入子實(shí)體分化期。
(4)子實(shí)體原基形成階段的管理 在人工培植過程中,子實(shí)體原基的形成是栽培成功的關(guān)鍵,良好的外界刺激如光照、干濕度、溫度等有利于子實(shí)體的分化、生長。
①加大溫差刺激 北冬蟲夏草真菌菌落生長溫度為0~30℃,最適溫度20~25℃,菌絲體在6℃以上、30℃以下均能生長。形成子實(shí)體的最佳溫度為10~20℃。子實(shí)體原基形成過程中,只有在保證溫差刺激的強(qiáng)度與周期時(shí)才會(huì)出草快、均勻。 溫差刺激范圍 人工培植冬蟲夏草,子實(shí)體原基的分化和生長適溫為10~25℃,最低不低于 5℃,最高不高于28℃,溫差刺激的范圍在20~10℃,即在20℃時(shí)向下降溫幅度至10℃。 溫差刺激強(qiáng)度 溫差刺激時(shí)間上,一般要求每天低溫刺激在l0小時(shí)左右,最低不少于6小時(shí)。 溫差刺激的周期 溫差刺激的周期要在 10~15天,若周期不夠長,則氣生菌絲生長旺盛,子實(shí)體分化不好、畸形多。
②增強(qiáng)光照刺激 在子實(shí)體形成階段,要求每天光照12小時(shí)以上,光線強(qiáng)度在200lx以上,如光線太弱或沒有光照,即使有足夠的溫差刺激,也會(huì)使子實(shí)體原基形成受阻,氣生菌絲旺長。
③保證空氣濕度,加強(qiáng)通風(fēng)透氣 在子實(shí)體形成階段,每天要求換氣3次、每次15分鐘,從而降低室內(nèi)C02的濃度,抑制菌絲旺長。空氣濕度應(yīng)保持在 70%左右。若濕度過大,氣生菌絲生長旺盛,子實(shí)體原基分化受阻,出草受到極大限制;若濕度過低,水分供應(yīng)跟不上,菌絲體向子實(shí)體轉(zhuǎn)化也會(huì)受阻。
(5)子實(shí)體原基生長階段的管理 從子實(shí)體原基形成到子實(shí)體成熟需20~30天,在這期間,不再需要進(jìn)行大的溫差刺激,一般溫度應(yīng)控制在18~25℃,應(yīng)加大濕度和通風(fēng)換氣工作,一般現(xiàn)蕾時(shí)空氣濕度達(dá)到80%左右,子實(shí)體長到lcm時(shí)增大到90~95%。隨著子實(shí)體的生長,瓶內(nèi)需要空氣,但又要減少水分散失,一般采取不去掉封口膜,而將挑針用75%酒精消毒后在封口膜上刺若干個(gè)小洞的方法來保證空氣交換和流通。
(6)成熟與采收 當(dāng)子實(shí)體長成上粗下細(xì)的棒狀,且表面出現(xiàn)粒狀粉末時(shí),表明子實(shí)體成熟,即可采收。采收時(shí)用帶彎頭的小鐵鏟,從子實(shí)體根部輕輕鏟起,不要傷及子實(shí)體。采收后應(yīng)及時(shí)分級烘干,在干燥箱中于40~60℃溫度下經(jīng)過2小時(shí)即可烘干。烘干后稍回潮使之不至于憔悴,用線扎成小捆放人塑料袋密封保存。