本課題組于2005年8月到2006年3月，在天津及華北地區進行了較大規模的白靈菇液體菌種生產與應用推廣工作，推廣面積達180棟棚室（560平方米/棟），平均生物學效率達45%，菇農與公司獲得了雙贏。現將該技術總結如下，以供大家參考。
1 固體母種制作
將冷藏的母種提前活化3～5d，制平板挑取優質菌絲尖端進行提純復壯。取新鮮無霉變的稻草切成3cm段200g；另取200g削皮、去芽的馬玲薯，切成棱形塊，約金桔大小，放入冷水盆備用。用不銹鋼鍋，加2000mL自來水（pH7.0～7.5）與上述馬玲薯及稻草同煮，煮沸計時30min，將其用多層醫用紗布過濾，取過濾液近1000mL，加瓊脂20g，完全溶化后，再加入葡萄糖20g，七水合硫酸鎂1.5g，磷酸氫二鉀3g，VB1，4mg完全溶解后，定溶1000ml，pH自然。大于45℃趁熱分裝18mm×180mm硬質試管110～125支，加棉塞，并用雙層聚丙烯塑料薄膜包好，7支1捆滅菌備用。滅菌壓力達0.12MPa記時，保持25min。冷卻至45℃將培養基試管取出，輕輕轉動試管，防止冷凝積水，立即擺斜面并去掉包膜防止其被污染。24h與48h后查有無細菌和霉菌。每批試管培養基污染率不得超過2%；否則，必須重做。培養基滅菌合格標準是斜面如同鏡面一般光滑，無冷凝水、無麻點，無雜菌。
保藏母種18mm×180mm硬質試管，每支可轉接30～60支生產母種。在無菌區內，挑取優質菌絲體，迅速接種于試管培養基上，一點接種。25℃條件下，暗培養，20～24h菌絲開始萌動，培養10～12d菌絲體可滿管。在此期間，每天檢查1次。如有雜菌，甚至雖無污染，但長勢不健壯的一并棄掉，嚴格把住菌種關。
2 液體培養基制備及液體菌種培養
液體菌種的生產使用天津市豐禾食用菌有限責任公司實驗設備廠生產、天津師范大學化學與生命科學學院監制的FHCC-LSI-64設備。
生產液體菌種必備的兩個條件：熟練掌握無菌操作技術；菌種生產環境干燥、整潔、可控溫26～28℃。
2.1 液體培養基制備 將土豆去皮去芽，切棱形塊200g，菇根適量，麥麩50g，一并放入不銹鋼鍋，文火煮沸30min，多層醫用紗布過濾，取過濾液加葡萄糖20g，磷酸二氫鉀3.0g，硫酸鎂1.5g，維生素B1，4mg，將其完全溶解后，定容1000mL。制備若干，分裝于40只圓形平底玻璃培養器（2000mL）中，裝量為1500～1600mL，并加磁子1只，高壓滅菌2h，28～30℃下接種，置電動磁力控制器上培養。
2.2 接種與終止培養的判斷 在無菌條件下，挑取試管母種菌絲體漂浮于培養器中，接種量為1支試管母種最多可接5400mL。多點接種，28℃條件下靜置培養48h，待出現菌落后，置電動磁力控制器上，26～28℃條件下培養。培養液顏色由深變淺，待培養至菌絲片段既不下沉，也不上浮，與液體混為一體時，可終止培養，84～96h。此時，視為壯齡期，方可用于接種。
2.3 液體菌種的鑒別 靜置培養液體菌種48h后，或終止培養后，無菌條件下取10mL檢查。一看：用放大鏡看是否有赤、橙、黃、綠、青、藍、紫等雜色，或在液體表面出現菌膜等異常現象，視為被污染；二聞：取出的培養物，若有異味，視為被雜菌污染。
3 出菇菌棒的制作與培養
出菇菌棒的制作：當地平均氣溫穩定在20℃左右開始裝袋。配方：棉子殼72%，木屑13%，麥麩8%，玉米粉2%，石膏粉2%，生石灰3%，另加菜園土15%。培養基含水量60%～62%，充分拌勻，建堆發酵，并加入發菌劑，發酵料堆底寬1.2m，堆高1.0m，堆長不限。自然建堆后打孔通氣孔距40～50cm。當料堆溫達55℃左右時，保持48h后，進行第1次翻堆，整堆打孔覆膜。當料堆溫達60～70℃時，每隔1d翻堆1次，并充分換位。共需7～8d，待料為均勻棕褐色，質地均勻，富有彈性，料味純正，料表面有較多的放線菌時，說明料發酵成功，散堆降溫，pH7.5～8.5，含水量60%可裝袋。選用與栽培種相同的菌袋，菌袋培養基料柱高約20cm，加無棉塑料封口蓋，6～8h內將料裝完，立即滅菌。每筐豎擺共20只菌棒。0.15MPa高壓滅菌2h，或常壓滅菌12～14h，50～60℃出鍋。32～35℃下接種，一端接種，接種量為40mL/袋，或每袋栽培種接出菇菌棒25只。栽培種的制作與培養配方：棉子殼87%，玉米粉3%，麥麩5%，石膏粉2%，生石灰3%。培養基料水比為1∶1.1～1.2，充分拌勻，悶料5～6h，迅速裝袋，低壓聚乙烯筒料，菌袋折徑（17cm×34cm×0.05cm），裝干料 550～600g。采用中間打孔的裝袋機裝袋，培養基料柱高約20cm，加無棉塑料蓋封口，裝筐滅菌。壓強0.15MPa高壓滅菌2h。一端接種，將菌液均勻地接種料面，接種量為 40mL/袋。25～28℃條件下常規培養，18～20d菌絲體滿袋，較固體菌種縮短8～10d。在氧原子消毒器下開放式接種，一般接出菇菌棒900～1000只/人?8h。4人配組接種最佳，要做到快打口蓋，快接種，快封口蓋。
出菇菌棒發菌培養：發菌必備四個基本條件：即暗培養、環境干燥、適宜的溫度、常通風換氣。發菌分為四個時期，即①菌絲萌動定植期：接種后先控制環境溫度在26～28℃，少通風或不通風，盡量不搬動菌袋。目的是使菌絲盡快渡過其遲緩期，早萌發，早定植。接種后的第10～18h菌種開始萌發， 24h菌絲開始吃料定植。②菌絲生長旺盛期：第4d后，菌絲細胞呼吸量逐漸增大，產生的熱量也逐漸增多，應保持料溫19～22℃，空氣相對濕度60%～65%，每天溫和通風2～3次。時常檢查菌絲的長勢、料溫，及時翻垛，發現有雜菌立即清除。約培養18～20d菌絲滿袋。③菌絲體復壯期：此時，菌袋表面已布滿菌絲體，但是，其內部還未布滿也不健壯，所以要對菌棒進行菌絲體復壯。復壯需要18～20℃培養7d左右。④菌絲體后熟期：所謂后熟期，是指由營養生長轉入生殖生長的準備期，主要是菌絲細胞內部的生理生化變化，為生殖生長作物質和能量的準備。需要35～45d后熟，及時排除袋內積水（菌絲老化細胞自溶出現的黃水）。控制溫度24～25℃，控制光照在500～800lx，適當減少通氣，減少菌棒表面菌皮過多的發生，并對菌棒進行最終分類。
4 出菇管理
4.1 排場 白靈菇出菇方式有多種，可根據實際情況選擇使用。按45～54只/平方米擺放菌袋，560平方米的溫室可擺放28000～30000只菌棒。選生長發育一致的菌棒，覆土碼垛出菇。只在搔菌的一端出菇，也可不搔菌直接出菇。具體的方法是對所用土進行常規消毒處理，割去菌袋中間薄膜2/3，出菇端留1/3，砌成單排菌墻，10～13層高，層于層和袋與袋之間間隔2cm，用泥勾縫，頂部留水槽，便于后期補營養液。
4.2 搔菌 菌絲體生理成熟的指標：一則菌棒內菌絲體潔白濃密；二是菌棒表面出現菌皮；三是菌棒堅硬；四是個別菌棒已出現白色米粒狀原基；五是有效積溫達2200～2500℃（有效積溫＝平均日溫×天數）。菌絲體達生理成熟應及時搔菌，即在菌棒一端中央處，挖掉大衣鈕扣大小（Φ3.5～4.0cm）的菌皮，露出新鮮菌絲體。搔菌過早、過遲均影響出菇。
4.3 養菌 將搔菌后松系袋口，升溫至20～22℃，盡量恒溫培養，使損傷的菌絲體得以恢復，即在搔菌處長出較多新的菌絲體。個別的會出現氣生菌絲，約需要5～7d。
4.4 以低溫為主刺激原基發生與分化 待搔菌處幾乎看不到培養料均為菌絲體時，給予菌棒－2～7℃低溫刺激，白天最適宜溫度7～14℃，以8℃為中心。晝夜溫差應保持10℃以上，連續7～15d左右。大于18℃時，原基難于分化成菌蕾。將空間濕度提高到75%～80%，只是在地面上撒水或溝里打水，并給予通氣和散射光800～1500lx的刺激。待原基出現后，繼續給予上述刺激，促使其原基分化成菌蕾。此時，應特別注意通氧氣。
4.5 疏花疏果 當原基為綠豆大小時，解袋口，待有的原基已分化為黃豆大小菇蕾時，上挽袋口的一半，并進行疏花疏果，即留大去小，留壯棄弱，只留1個長勢健壯形狀規則的菇蕾，且不可改變菌蕾方向或位置。待菇蕾發育至鴿子蛋大小時，將袋口完全割去。
4.6 育菇疏花疏果后，迅速調室內相對濕度80%～85%，散射光強度600～1000lx，光照度12～14h/d，提升溫度至10～14℃，盡量恒溫培養，常通風換氣。12～15d即可采收。
5 采收加工與保鮮
5.1 采收 當白靈菇重120～200g/只，即可采收。采收前1日停水。每天早晚各采收1次。白靈菇可分4個等級，即一級；子實體掌形，菇形規則，菇體潔白，菌蓋直徑8～150n，每只120～200g，菌蓋平展，表面光滑，邊緣圓正未上蹺，無明顯的皺褶或裂痕。菌褶排列整齊，菌柄小于2.0cm。二級：菇體潔白，菇形掌狀，菇形基本規則，菌蓋直徑8～16cm，每只在75～250g，菌蓋較平滑或稍有波紋，菌蓋基本圓正，沒有明顯的裂痕，菌褶排列較整齊，菌柄小于2.0cm。三級：菇體潔白，菇形掌狀，菇形較規則，菌蓋直徑7～16cm，每只在50～250g，菌蓋有波紋邊緣呈波浪形，菌蓋表面有細微的裂痕，菌褶排列不整齊，無明顯病斑，菌柄在2～5.0cm。等外品：不符合上述三級產品的統稱為等外品。
5.2 保鮮 將掌形子實體的菇菌柄切至2.0cm，用食品軟紙包好每個子實體，放入泡沫箱中每箱3～5kg。30cm×47cm×20cm的泡沫塑料箱，箱重0.45kg。裝箱的白靈菇，室內溫度在－6～－8℃條件下，可保鮮25～30d；4～10℃下冷藏，可保鮮15～25d；15℃可保質4～5d。如在0～1℃預冷15～20h，5～10kg的箱，0℃（－0.5～0.5℃）條件下可保鮮1～2個月。
1 固體母種制作
將冷藏的母種提前活化3～5d，制平板挑取優質菌絲尖端進行提純復壯。取新鮮無霉變的稻草切成3cm段200g；另取200g削皮、去芽的馬玲薯，切成棱形塊，約金桔大小，放入冷水盆備用。用不銹鋼鍋，加2000mL自來水（pH7.0～7.5）與上述馬玲薯及稻草同煮，煮沸計時30min，將其用多層醫用紗布過濾，取過濾液近1000mL，加瓊脂20g，完全溶化后，再加入葡萄糖20g，七水合硫酸鎂1.5g，磷酸氫二鉀3g，VB1，4mg完全溶解后，定溶1000ml，pH自然。大于45℃趁熱分裝18mm×180mm硬質試管110～125支，加棉塞，并用雙層聚丙烯塑料薄膜包好，7支1捆滅菌備用。滅菌壓力達0.12MPa記時，保持25min。冷卻至45℃將培養基試管取出，輕輕轉動試管，防止冷凝積水，立即擺斜面并去掉包膜防止其被污染。24h與48h后查有無細菌和霉菌。每批試管培養基污染率不得超過2%；否則，必須重做。培養基滅菌合格標準是斜面如同鏡面一般光滑，無冷凝水、無麻點，無雜菌。
保藏母種18mm×180mm硬質試管，每支可轉接30～60支生產母種。在無菌區內，挑取優質菌絲體，迅速接種于試管培養基上，一點接種。25℃條件下，暗培養，20～24h菌絲開始萌動，培養10～12d菌絲體可滿管。在此期間，每天檢查1次。如有雜菌，甚至雖無污染，但長勢不健壯的一并棄掉，嚴格把住菌種關。
2 液體培養基制備及液體菌種培養
液體菌種的生產使用天津市豐禾食用菌有限責任公司實驗設備廠生產、天津師范大學化學與生命科學學院監制的FHCC-LSI-64設備。
生產液體菌種必備的兩個條件：熟練掌握無菌操作技術；菌種生產環境干燥、整潔、可控溫26～28℃。
2.1 液體培養基制備 將土豆去皮去芽，切棱形塊200g，菇根適量，麥麩50g，一并放入不銹鋼鍋，文火煮沸30min，多層醫用紗布過濾，取過濾液加葡萄糖20g，磷酸二氫鉀3.0g，硫酸鎂1.5g，維生素B1，4mg，將其完全溶解后，定容1000mL。制備若干，分裝于40只圓形平底玻璃培養器（2000mL）中，裝量為1500～1600mL，并加磁子1只，高壓滅菌2h，28～30℃下接種，置電動磁力控制器上培養。
2.2 接種與終止培養的判斷 在無菌條件下，挑取試管母種菌絲體漂浮于培養器中，接種量為1支試管母種最多可接5400mL。多點接種，28℃條件下靜置培養48h，待出現菌落后，置電動磁力控制器上，26～28℃條件下培養。培養液顏色由深變淺，待培養至菌絲片段既不下沉，也不上浮，與液體混為一體時，可終止培養，84～96h。此時，視為壯齡期，方可用于接種。
2.3 液體菌種的鑒別 靜置培養液體菌種48h后，或終止培養后，無菌條件下取10mL檢查。一看：用放大鏡看是否有赤、橙、黃、綠、青、藍、紫等雜色，或在液體表面出現菌膜等異常現象，視為被污染；二聞：取出的培養物，若有異味，視為被雜菌污染。
3 出菇菌棒的制作與培養
出菇菌棒的制作：當地平均氣溫穩定在20℃左右開始裝袋。配方：棉子殼72%，木屑13%，麥麩8%，玉米粉2%，石膏粉2%，生石灰3%，另加菜園土15%。培養基含水量60%～62%，充分拌勻，建堆發酵，并加入發菌劑，發酵料堆底寬1.2m，堆高1.0m，堆長不限。自然建堆后打孔通氣孔距40～50cm。當料堆溫達55℃左右時，保持48h后，進行第1次翻堆，整堆打孔覆膜。當料堆溫達60～70℃時，每隔1d翻堆1次，并充分換位。共需7～8d，待料為均勻棕褐色，質地均勻，富有彈性，料味純正，料表面有較多的放線菌時，說明料發酵成功，散堆降溫，pH7.5～8.5，含水量60%可裝袋。選用與栽培種相同的菌袋，菌袋培養基料柱高約20cm，加無棉塑料封口蓋，6～8h內將料裝完，立即滅菌。每筐豎擺共20只菌棒。0.15MPa高壓滅菌2h，或常壓滅菌12～14h，50～60℃出鍋。32～35℃下接種，一端接種，接種量為40mL/袋，或每袋栽培種接出菇菌棒25只。栽培種的制作與培養配方：棉子殼87%，玉米粉3%，麥麩5%，石膏粉2%，生石灰3%。培養基料水比為1∶1.1～1.2，充分拌勻，悶料5～6h，迅速裝袋，低壓聚乙烯筒料，菌袋折徑（17cm×34cm×0.05cm），裝干料 550～600g。采用中間打孔的裝袋機裝袋，培養基料柱高約20cm，加無棉塑料蓋封口，裝筐滅菌。壓強0.15MPa高壓滅菌2h。一端接種，將菌液均勻地接種料面，接種量為 40mL/袋。25～28℃條件下常規培養，18～20d菌絲體滿袋，較固體菌種縮短8～10d。在氧原子消毒器下開放式接種，一般接出菇菌棒900～1000只/人?8h。4人配組接種最佳，要做到快打口蓋，快接種，快封口蓋。
出菇菌棒發菌培養：發菌必備四個基本條件：即暗培養、環境干燥、適宜的溫度、常通風換氣。發菌分為四個時期，即①菌絲萌動定植期：接種后先控制環境溫度在26～28℃，少通風或不通風，盡量不搬動菌袋。目的是使菌絲盡快渡過其遲緩期，早萌發，早定植。接種后的第10～18h菌種開始萌發， 24h菌絲開始吃料定植。②菌絲生長旺盛期：第4d后，菌絲細胞呼吸量逐漸增大，產生的熱量也逐漸增多，應保持料溫19～22℃，空氣相對濕度60%～65%，每天溫和通風2～3次。時常檢查菌絲的長勢、料溫，及時翻垛，發現有雜菌立即清除。約培養18～20d菌絲滿袋。③菌絲體復壯期：此時，菌袋表面已布滿菌絲體，但是，其內部還未布滿也不健壯，所以要對菌棒進行菌絲體復壯。復壯需要18～20℃培養7d左右。④菌絲體后熟期：所謂后熟期，是指由營養生長轉入生殖生長的準備期，主要是菌絲細胞內部的生理生化變化，為生殖生長作物質和能量的準備。需要35～45d后熟，及時排除袋內積水（菌絲老化細胞自溶出現的黃水）。控制溫度24～25℃，控制光照在500～800lx，適當減少通氣，減少菌棒表面菌皮過多的發生，并對菌棒進行最終分類。
4 出菇管理
4.1 排場 白靈菇出菇方式有多種，可根據實際情況選擇使用。按45～54只/平方米擺放菌袋，560平方米的溫室可擺放28000～30000只菌棒。選生長發育一致的菌棒，覆土碼垛出菇。只在搔菌的一端出菇，也可不搔菌直接出菇。具體的方法是對所用土進行常規消毒處理，割去菌袋中間薄膜2/3，出菇端留1/3，砌成單排菌墻，10～13層高，層于層和袋與袋之間間隔2cm，用泥勾縫，頂部留水槽，便于后期補營養液。
4.2 搔菌 菌絲體生理成熟的指標：一則菌棒內菌絲體潔白濃密；二是菌棒表面出現菌皮；三是菌棒堅硬；四是個別菌棒已出現白色米粒狀原基；五是有效積溫達2200～2500℃（有效積溫＝平均日溫×天數）。菌絲體達生理成熟應及時搔菌，即在菌棒一端中央處，挖掉大衣鈕扣大小（Φ3.5～4.0cm）的菌皮，露出新鮮菌絲體。搔菌過早、過遲均影響出菇。
4.3 養菌 將搔菌后松系袋口，升溫至20～22℃，盡量恒溫培養，使損傷的菌絲體得以恢復，即在搔菌處長出較多新的菌絲體。個別的會出現氣生菌絲，約需要5～7d。
4.4 以低溫為主刺激原基發生與分化 待搔菌處幾乎看不到培養料均為菌絲體時，給予菌棒－2～7℃低溫刺激，白天最適宜溫度7～14℃，以8℃為中心。晝夜溫差應保持10℃以上，連續7～15d左右。大于18℃時，原基難于分化成菌蕾。將空間濕度提高到75%～80%，只是在地面上撒水或溝里打水，并給予通氣和散射光800～1500lx的刺激。待原基出現后，繼續給予上述刺激，促使其原基分化成菌蕾。此時，應特別注意通氧氣。
4.5 疏花疏果 當原基為綠豆大小時，解袋口，待有的原基已分化為黃豆大小菇蕾時，上挽袋口的一半，并進行疏花疏果，即留大去小，留壯棄弱，只留1個長勢健壯形狀規則的菇蕾，且不可改變菌蕾方向或位置。待菇蕾發育至鴿子蛋大小時，將袋口完全割去。
4.6 育菇疏花疏果后，迅速調室內相對濕度80%～85%，散射光強度600～1000lx，光照度12～14h/d，提升溫度至10～14℃，盡量恒溫培養，常通風換氣。12～15d即可采收。
5 采收加工與保鮮
5.1 采收 當白靈菇重120～200g/只，即可采收。采收前1日停水。每天早晚各采收1次。白靈菇可分4個等級，即一級；子實體掌形，菇形規則，菇體潔白，菌蓋直徑8～150n，每只120～200g，菌蓋平展，表面光滑，邊緣圓正未上蹺，無明顯的皺褶或裂痕。菌褶排列整齊，菌柄小于2.0cm。二級：菇體潔白，菇形掌狀，菇形基本規則，菌蓋直徑8～16cm，每只在75～250g，菌蓋較平滑或稍有波紋，菌蓋基本圓正，沒有明顯的裂痕，菌褶排列較整齊，菌柄小于2.0cm。三級：菇體潔白，菇形掌狀，菇形較規則，菌蓋直徑7～16cm，每只在50～250g，菌蓋有波紋邊緣呈波浪形，菌蓋表面有細微的裂痕，菌褶排列不整齊，無明顯病斑，菌柄在2～5.0cm。等外品：不符合上述三級產品的統稱為等外品。
5.2 保鮮 將掌形子實體的菇菌柄切至2.0cm，用食品軟紙包好每個子實體，放入泡沫箱中每箱3～5kg。30cm×47cm×20cm的泡沫塑料箱，箱重0.45kg。裝箱的白靈菇，室內溫度在－6～－8℃條件下，可保鮮25～30d；4～10℃下冷藏，可保鮮15～25d；15℃可保質4～5d。如在0～1℃預冷15～20h，5～10kg的箱，0℃（－0.5～0.5℃）條件下可保鮮1～2個月。
